猪乙型脑炎病毒SH0601株基因组序列分析及全长cDNA的构建

被引：13

作者：

郑浩

余丹丹

孙志

高飞

袁世山

机构：

[1] 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病防治研究室

[2] 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病防治研究室上海

来源：

中国人兽共患病学报 | 2008年 / 02期

关键词：

乙型脑炎病毒; 病毒基因组; 全长cDNA克隆;

D O I：

暂无

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学];

学科分类号：

090507 [智慧养殖与动物生产学];

摘要：

目的对猪源乙型脑炎病毒SH0601株进行全序列测定与分析,以了解该株病毒的遗传特征,并构建全长cDNA克隆。方法将猪源JEV SH0601株基因组RNA分5段进行RT-PCR并克隆入pCRⅡ-Blunt-TOPO和pBluescript载体中,测定了全长cDNA序列。根据cDNA克隆酶切图谱分析,将5个片段先后克隆入pBluescript中构建JEV全长基因组cDNA。根据E蛋白基因序列对SH0601株进行了遗传分型。结果序列分析表明:SH0601株基因组全长10977nt,与GenBank中的Beijing-1、P3、SA14和SA14-14-2株基因组全长相比,在3′NTR的10701nt处多一碱基"G",与上述4株病毒的全长核苷酸的同源率都达97.2%以上,而与国外猪源分离株KV1899和JEV/sw/Mie/41/2002全长核苷酸的同源率仅达88.7%,但SH0601株与6株病毒的全长氨基酸同源率均达97.0%以上。以E蛋白基因序列对SH0601作进化分析,该分离株属基因型Ⅲ型。结论SH0601株属于乙型脑炎病毒基因Ⅲ型。在高拷贝质粒pBluescript中可构建稳定的乙型脑炎病毒全长cDNA克隆。

引用

页码：140 / 145

页数：6

共 8 条

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