成鼠神经干细胞的分离、克隆和增殖

被引：16

作者：

金国华

黄镇

田美玲

张新化

秦建兵

徐慧君

机构：

[1] 南通医学院神经生物学研究室

[2] 南通医学院神经生物学研究室南通

[3] 南通

来源：

南通医学院学报 | 2001年 / 04期

关键词：

神经干细胞; 分离; 克隆; 增殖; 成鼠;

D O I：

暂无

中图分类号：

R329.2 [人体细胞学];

学科分类号：

100101 ;

摘要：

目的 :从成年大鼠前脑室下带 (SVZ)中分离神经干细胞 ,证实其增殖潜能和胚胎源性。方法 :利用无血清培养和单细胞克隆技术 ,在成年大鼠 SVZ中分离出具有多潜能的神经干细胞。在单细胞克隆实验中 ,将培养板分为两组 :第 1组采用纯新鲜培养液 ,第 2组为新鲜与原代培养液各半的混合液。选取单个细胞克隆连续传代获得大量来源于同一细胞的亚细胞系克隆。用 5 -溴 - 2 -脱氧尿苷 (Brd U)标记和免疫荧光检测证实其增殖潜能 ,并用免疫荧光技术检测神经上皮干细胞蛋白 (Nestin)抗原的表达以证实其胚胎源性。结果 :原代培养 1周后每瓶细胞培养液中可见形成数百个神经球 ;单细胞克隆实验中 ,第 1组每板仅见 0 .5～ 1个孔形成克隆 ,而第 2组中每板有 2 - 3孔形成克隆 ,这些克隆细胞可连续传代。Brd U标记、免疫荧光检测及 Nestin免疫荧光标记均获得阳性结果。结论 :采用新鲜和原代培养液各半混合的方法可提高神经干细胞单克隆形成率 ,且本实验中分离培养的神经干细胞具有增殖潜能和胚胎源性。我们的研究结果为下一步神经干细胞的分化研究奠定了基础

引用

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页数：4

共 11 条

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