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孤儿受体TR3与人CNTF受体基因中顺式元件作用机制的研究
被引：5
作者：
穆小民
刘以训
张传祥
机构：
[1] 中国科学院动物研究所生殖生物学国家重点实验室,美国威斯康辛大学癌症研究中心
来源：
关键词：
孤儿受体TR3，睫状神经营养因子受体，报道基因，表达调控;
D O I：
暂无
中图分类号：
Q78 [基因工程（遗传工程）];
学科分类号：
071007 [遗传学];
摘要：
应用两对人工合成的寡核苷酸引物，分别通过ＰＣＲ扩增，得到了ＣＮＴＦＲα－Ｉ５ＮＢＲＥ序列两侧的两个扩增片段，将其和在ＥｃｏＲⅤ位点切开的ｐＴ７ｂｌｕｅ一起定向连接，得到了插入在ｐＴ７ｂｌｕｅ的ＥｃｏＲⅤ位点的缺失了ＮＢＲＥ序列的ＣＮＴＦＲα－Ｉ５，然后再将其切下，插入到具有ＳＶ４０起动子的ＣＡＴ基因表达载体的ＢｇｌⅡ位点，构建了ＣＡＴ报道基因．细胞转染和ＣＡＴ实验表明，缺失ＮＢＲＥ后，ＣＮＴＦＲα－Ｉ５仍具有增强子功能，ＴＲ３通过该增强子对ＣＮＴＦＲα的表达具有诱导作用，说明这种诱导作用并不是单一通过ＮＢＲＥ序列进行的．
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页数：7
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