复方接骨中药对骨髓间充质干细胞体外增殖及向成骨细胞分化的影响

被引:32
作者
范红旗
孙辉生
刘振旗
王振虎
吴清华
沙永顺
机构
[1] 解放军第二五二医院骨科
关键词
复方接骨中药; 含药血清; 骨髓间充质干细胞; 成骨细胞; 增殖; 分化; 中药血清药理学;
D O I
暂无
中图分类号
R285 [中药药理学];
学科分类号
摘要
目的:分析复方接骨中药对体外培养的骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响。方法:实验于2003-12/2005-02在解放军第二五二医院完成。①取体质量(250±10)g的雄性SD大鼠60只,随机分为实验组和对照组,每组30只。②复方接骨中药(厚朴10g,大黄10g,枳壳10g,桃仁10g,苏木10g,当归10g,红花5g,骨碎补15g,川断15g,熟地15g,自然铜10g,龟板10g,枸杞15g,杜仲15g)按体表面积折算为SD大鼠的等效剂量后,按中医传统方法煎制,灌喂量2.5mL/(只·d)。于晨8:00灌喂实验组大鼠。在同样的条件下用等量浓缩自来水灌喂对照组。两组均连续灌喂10d。末次灌喂前一天20:00大鼠禁食禁水,末次灌喂后2h,取股动脉血制备出含药血清及对照血清。③取3个月龄雄性SD大鼠1只,在无菌条件下取股骨、胫骨骨髓,实验组骨髓细胞采用体积分数为0.1含药血清+DMEM培养。对照组骨髓细胞采用体积分数为0.1非含药血清+DMEM培养,传代3次后用于实验。每日于倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化,于培养第24,48,72,96,120小时用四唑盐法检测细胞的增殖情况(用吸光度表示),于培养1,2,3,4周末用碱性磷酸酶检测细胞分化情况。结果:60只大鼠均进入结果分析。①两组细胞的生长曲线均呈“S”形,在72,96,120h时实验组细胞均比对照组细胞增殖迅速(吸光度值分别为0.213±0.021,0.192±0.032;0.341±0.031,0.274±0.021;0.401±0.016,0.325±0.014,P<0.05,P<0.01,P<0.01)。②两组细胞均是在第2周末时碱性磷酸酶活力达到高峰,第3周末开始下降。第2,3周末时实验组碱性磷酸酶活力显著大于对照组[(10.28±0.71),(7.41±0.53)nkat/L,P<0.01;(8.81±0.76),(6.37±0.41)nkat/L,P<0.05]。③镜下观察实验组骨髓间充质干细胞大量诱导分化为成骨细胞,对照组成骨细胞数量、密度明显低于实验组。结论:复方接骨中药可以促进体外培养的骨髓间充质干细胞增殖及向成骨细胞方向分化。
引用
收藏
页码:1818 / 1821+1825 +1825
页数:5
相关论文
共 10 条
[1]   “组分中药学”假说的构想 [J].
付建华 ;
付宇 ;
刘建勋 .
中国中医药信息杂志, 2006, (01) :52-54
[2]   转化生长因子-β、碱性成纤维生长因子和血小板衍生生长因子在骨折愈合中的表达 [J].
俞猛 ;
夏仁云 ;
高飙 .
实用医学杂志, 2005, (24) :2728-2731
[3]   骨碎补各种提取成分对人骨髓间充质干细胞的影响 [J].
邓展生 ;
张璇 ;
邹冬青 ;
许宇霞 ;
胡懿合 .
中国现代医学杂志, 2005, (16) :2426-2429
[4]   FGFs/FGFRs在骨折愈合过程中作用的研究进展 [J].
陈波 ;
陈林 .
医学分子生物学杂志, 2005, (02) :126-128
[5]   我国成骨细胞研究、应用现状和发展前景 [J].
田三德 ;
张宏 ;
杨辉 .
陕西科技大学学报, 2005, (01) :91-94
[6]   中药复方药理研究方法进展——血清药理学 [J].
刘红 .
湖北民族学院学报(医学版), 2004, (04) :38-40
[7]   人骨髓间质干细胞作为骨、软骨组织工程种子细胞的实验研究 [J].
庞永刚 ;
崔鹏程 ;
陈文弦 ;
曹云新 .
细胞与分子免疫学杂志, 2004, (03) :306-309
[8]   大鼠骨髓间充质干细胞分离、体外培养和向软骨细胞表型定向分化的实验研究 [J].
丁晓飞 ;
赵劲民 ;
陈维平 ;
杨志 ;
苏伟 .
广西医科大学学报, 2004, (02) :179-182
[9]  
Methods for the evaluation of biocompatibility of soluble synthetic polymers which have potential for biomedical use: 1 — Use of the tetrazolium-based colorimetric assay (MTT) as a preliminary screen for evaluation of in vitro cytotoxicity[J] . D. Sgouras,R. Duncan.Journal of Materials Science: Materials in Medicine . 1990 (2)
[10]   BONE-FORMATION INVITRO BY STROMAL CELLS OBTAINED FROM BONE-MARROW OF YOUNG-ADULT RATS [J].
MANIATOPOULOS, C ;
SODEK, J ;
MELCHER, AH .
CELL AND TISSUE RESEARCH, 1988, 254 (02) :317-330