4种血浆游离DNA提取方法的比较

被引:23
作者
严子禾 [1 ]
潘世扬 [2 ]
陈丹 [2 ]
魏源华 [2 ]
高丽 [2 ]
谢而付 [2 ]
黄珮珺 [2 ]
戎国栋 [2 ]
胡宜蘅 [2 ]
童明庆 [2 ]
机构
[1] 无锡市第二人民医院检验科
[2] 南京医科大学第一附属医院医学检验中心
关键词
血浆游离DNA; 荧光定量PCR; 提取效率;
D O I
10.13602/j.cnki.jcls.2006.05.021
中图分类号
Q523-33 [];
学科分类号
071010 ; 081704 ;
摘要
目的比较4种方法对血浆游离结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)DNA和质粒DNA的提取效率。方法MTBDNA和重组质粒DNA经紫外分光光度法准确定量并梯度稀释,建立标准品。构建含有一定浓度MTBDNA和质粒DNA的血浆,分别采用4种方法提取血浆游离DNA,采用实时荧光PCR技术定量检测模拟血浆中MTBDNA和质粒DNA的含量,比较各种方法的提取效率。结果4种方法中,磁珠法对MTBDNA和质粒DNA的提取效率最高,分别为52.8%和69.2%;相对丢失率最低,分别为40.1%和31.8%;重复性最好,其变异系数分别为26.7%和26.0%。结论在4种方法中,磁珠法对血浆游离DNA的提取效率最高,尤其适合于小片段DNA的提取。
引用
收藏
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页数:3
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