水产品中霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌多重PCR检测方法的建立

被引:19
作者
蒋蔚 [1 ]
易力 [2 ]
陈永军 [1 ]
何再平 [1 ]
白雪瑞 [1 ]
赵梦苏 [2 ]
刘景云 [2 ]
王权 [1 ]
机构
[1] 中国农业科学院上海兽医研究所
[2] 洛阳师范学院生命科学学院
关键词
霍乱弧菌; 副溶血弧菌; 创伤弧菌; groEL基因; 多重PCR;
D O I
暂无
中图分类号
TS254.7 [水产制品的标准与检验];
学科分类号
083204 ;
摘要
霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌是引起全球范围的食源性疾病的重要病原菌,建立一种能准确鉴别这3种弧菌的方法具有重要意义。groEL基因是包括弧菌属在内的多种细菌检测的分子标记。本研究根据3种弧菌的groEL基因分别设计引物,经PCR扩增及反应条件的优化,建立一种能同时检测这3种弧菌的多重PCR方法。结果表明应用多重PCR技术对霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌能分别特异性地扩增出418、644、192 bp的目的片段。检测其他非目标供试菌时,不出现任何扩增条带。敏感性检测结果表明,对霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌最低检测限分别为102、102、103CFU/m L。人工染菌水产品检测结果显示,所建立的多重PCR方法能够有效检测出目的细菌,而未染菌组均为阴性。本文通过建立的多重PCR方法实现了对这3种弧菌的同时检测,具有快速、灵敏度高和特异性强等优点,对水产品中这3种弧菌的检测和流行病学调查具有重要意义。
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