目的建立一种柱前衍生反相高效液相色谱荧光检测法同时测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、半胱氨酸(cysteine,Cys)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine,CysGly)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)的方法。方法以tris(2carboxylethyl)phosphine(TCEP)为还原剂,7fluorbenzo2oxa1,3diazole4sulfonate(SBDF)为衍生剂,N乙酰半胱氨酸(Nacetylcystine,NAC)为内标,C8柱分离。流动相为甲醇磷酸盐缓冲液(25mmol/L,pH3.0),梯度洗脱,激发波长(λex)380nm,发射波长(λem)510nm,内标标准曲线法定量。结果Hcy、Cys、CysGly、GSH的线性范围分别为1.0~160.0μmol/L,30.0~1040.0μmol/L,2.0~300.0μmol/L,1.0~130.0μmol/L,具有良好的相关性,r为0.9994~0.9999。最低检测限为0.1~2.0μmol/L。日内精密度不超过3.0%,日间精密度除GSH为13.21%外均小于6.0%。平均回收率为87.24%~114.99%。结论本方法准确、灵敏、快速、特异,适合于实验室研究和临床常规检测。