两种方法建立大鼠骨性关节炎模型中软骨细胞变化比较

被引:17
作者
刘军 [1 ]
李旭升 [1 ]
甄平 [1 ]
李玉娟 [2 ]
周胜虎 [1 ]
王伟 [1 ]
何晓乐 [3 ]
机构
[1] 中国人民解放军联勤保障部队医院(原兰州总医院)全军骨科中心
[2] 中国人民解放军联勤保障部队医院(原兰州总医院)手麻科
[3] 空军军医大学西京医院老年病科
关键词
肿瘤坏死因子-α; 骨性关节炎; 细胞凋亡; 炎症因子; 动物模型;
D O I
暂无
中图分类号
R684.3 [关节炎]; R-332 [医用实验动物学];
学科分类号
100220 [骨科学]; 100402 [劳动卫生与环境卫生学];
摘要
为了比较常规手术法及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)干预法构建大鼠骨性关节炎模型的差异,探寻骨性关节炎前期动物研究中简捷有效的模型建立方法。通过选取36只SPF级SD大鼠雄性随机分为健康对照组(control group)、假手术组(sham-operated group)、手术组(operated group)和TNF-α干预组(TNF-αgroup),4周后取材,培养提取的各组原代软骨细胞,采用MTT比色法检测不同处理后对软骨细胞活力的影响;红胞调之原位检测(TUNEL)法检测软骨细胞凋亡率;蛋白印迹法(western blot)检测炎症因子MCP-1、MMP9及ICAM1的表达水平变化。结果表明:四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测提示经各组不同方法处理后软骨细胞活力未见明显改变,TUNEL法检测结果提示:各组之间相比较统计分析后,与对照组比较,手术组和TNF-α干预组软骨细胞凋亡率较高(P <0. 01),手术组和TNF-α干预组两者之间无显著差异(P> 0. 05);与假手术组相比,手术组和TNF-α干预组处理后,软骨细胞凋亡率显著升高(P <0. 01);对照组与假手术组、手术组和TNF-α干预组之间分别比较,软骨细胞凋亡率无明显变化(P> 0. 05)。Western blot结果表明:分别与对照组和假手术组相比较,手术组和TNF-α干预组软骨细胞MCP-1、MMP9及ICAM1表达水平增高(P <0. 01),手术组和TNF-α干预组之间各指标改变无统计学差异(P> 0. 05)。可见给予TNF-α干预可促使软骨细胞凋亡率及炎症因子指标增高,其对软骨细胞的影响与手术组相似,可成为一种简捷有效的大鼠骨性关节炎模型建立方法。
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