凝血酶通过内皮素介导刺激肾小球系膜细胞增生

目的研究内皮素 １（ＥＴ １）在凝血酶刺激的肾小球系膜细胞增生中的作用。方法在培养人肾小球系膜细胞（ＨＭＣ）中进行试验。（１）刺激试验：以凝血酶为刺激物，用氮蓝四唑盐（ＭＴＴ）方法检测ＨＭＣ增生程度；用放射免疫分析（ＲＩＡ）测定ＥＴ １蛋白浓度，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析前内皮素原（ｐｐＥＴ １）ｍＲＮＡ表达。（２）抑制试验：将ＥＴ １抗血清、选择性内皮素受体ＥＴＡ拮抗剂和的反义寡核苷酸分别作为三个不同水平的ＥＴ １抑制剂，用ＭＴＴ方法观察它们对凝血酶诱导的ＨＭＣ增生的抑制作用。结果（１）ＨＭＣ在凝血酶刺激下增生，呈剂量依赖并与刺激时间有关，当凝血酶１６Ｕ／ｍｌ刺激１６小时时ＨＭＣ增生达高峰（Ｐ＜０．０５）；ＨＭＣ在凝血酶刺激下分泌ＥＴ １蛋白增加，其剂量曲线和时间曲线分别与ＨＭＣ的增生曲线相平行；ＨＭＣ的ｐｐＥＴ １ｍＲＮＡ表达能够被凝血酶上调，凝血酶１６Ｕ／ｍｌ刺激８、１６小时其水平分别为对照组的７．９和３．４倍。（２）ＥＴ １抗血清、ＥＴＡ受体拮抗剂和ｐｐＥＴ １的反义寡核苷酸均能抑制凝血酶刺激的ＨＭＣ增生（各组均为Ｐ＜０．０５）。结论凝血酶刺激ＨＭＣ产生ＥＴ １，ＥＴ １介导了ＨＭＣ增生。