木糖代谢基因表达水平对酿酒酵母重组菌株产物形成的影响

被引:16
作者
鲍晓明
高东
曲音波
王祖农
机构
[1] 山东大学生命科学院微生物系微生物技术国家重点实验室,隆德大学应用微生物系
基金
高等学校博士学科点专项科研基金;
关键词
酿酒酵母,木糖代谢,XR/XDH;
D O I
10.13345/j.cjb.1997.04.004
中图分类号
TS261.1 [酿酒微生物];
学科分类号
摘要
以E.coli S.cerevisiae穿梭质粒YEp24为骨架,将树干毕赤酵母(PichiastipitisCBS6054)的木糖还原酶(XylosereductaseXR)基因XYL1及木糖醇脱氢酶(Xylolitoldehydro genaseXDH)基因XYL2分别以不同的相对表达方向置于酿酒酵母的乙醇脱氢酶I(ADH1)启动子和磷酸甘油激酶(PGK)启动子下,构建不同XYL1及XYL2的重组质粒。这些重组质粒分别转化酿酒酵母(S.cerevisiaeH158)受体菌。得到的重组菌株表现出不同的基因表达水平,XR与XDH的酶比活力比值即XR/XDH的变化范围在006~175之间。当XYL1或XYL2受PGK1启动子控制同时位于ADH1启动子下游时,检测到最高的酶比活力。为了加强对木糖的利用,在XYL1、XYL2基因的酵母重组菌株中又引入磷酸戊糖途径中的转醛酶(Transaldolase)基因TAL1及转酮酶(Transketolase)基因TKL1,使酵母菌在原有水平的基础上超表达合成转酮酶及转醛酶。同时具有XYL1和XYL2以及超表达基因TAL1、TKL1的酵母重组菌株可以在木糖为唯一碳源平板
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