表达猫瘟热病毒VP2蛋白重组腺病毒的构建及其免疫原性研究

被引:4
作者
杨松涛 [1 ]
夏咸柱 [2 ]
乔军 [1 ]
常爽 [3 ]
谢之景 [1 ]
鞠会艳 [3 ]
邹啸环 [1 ]
机构
[1] 军事医学科学院军事兽医研究所
[2] 中国工程院
[3] 吉林大学农学部
关键词
猫瘟热病毒; 猫泛自细胞减少症病毒; VP2蛋白; 重组腺病毒; 免疫原性;
D O I
暂无
中图分类号
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号
090601 ;
摘要
为构建能表达FPV VP2蛋白的重组犬2型腺病毒(CAV-2)载体。首先用PCR方法从FPV GT-2株细胞培 养物中扩增出了VP2蛋白基因,将其克隆到真核表达质粒pVAX1中构建了含有FPV vp2基因的表达盒(CMV- VP2-PolyA),将该表达盒酶切后定向克隆到含有CAV-2 E3区的穿梭质粒pVAX△E3中,构建出pVAX △E3VP2。用Sal I+Nru I双酶切pVAX△E3VP2,回收含有目的基因表达盒部分,将其定向克隆入含有CAV-2 全基因组的骨架质粒pPoly2-CAV-2中,构建了重组质粒pCAV-2-FPV-VP2。Cla I+Asc I酶切pCAV-2-FPV- VP2释放出重组基因组,以此转染MDCK细胞,获得了重组病毒CAV-2-VP2。该重组病毒能使MDCK细胞产生 腺病毒样细胞病变。Western blot检测证实,该重组病毒能表达具有免疫学活性的VP2蛋白。该重组病毒可以有 效地诱导免疫猫产生抗FPV和CAV-2抗体。本实验表明该重组病毒有可能成为一个FPV的疫苗株。
引用
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页数:5
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