人重组载脂蛋白E在大肠杆菌中的表达和纯化

被引:1
作者
国汉邦
董军
王抒
机构
[1] 卫生部北京医院老年医学研究所
关键词
载脂蛋白E; 重组蛋白; 表达; 纯化;
D O I
暂无
中图分类号
R346 [];
学科分类号
摘要
用含有载脂蛋白EcDNA的PET32a原核表达载体转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,使之高效表达载脂蛋白E thioredoxin融合蛋白。利用融合蛋白上的一段组氨酸序列 ,用镍离子亲合层析柱进行分离纯化。由于在载脂蛋白E和thioredoxin之间存在凝血酶的识别位点 ,用凝血酶消化后 ,经SephacrylS 30 0凝胶过滤得到人重组载脂蛋白E。用此方法可以从 1L大肠杆菌培养液中纯化 2 0~ 30mg高纯度的各种载脂蛋白E异构体和非自然存在的突变体 ,方法简便 ,产量高 ,纯度达 95 %以上。
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