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广宿主稳定表达载体pQMV和pGMP的构建
被引:3
作者:
胡玉琴
张杰
宋福平
束长龙
黄大昉
机构:
[1] 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室
[2] 中国农业科学院生物技术研究所
来源:
关键词:
绿色荧光蛋白基因;
荧光假单胞菌;
启动子;
穿梭表达载体;
D O I:
暂无
中图分类号:
Q782 [基因载体];
学科分类号:
摘要:
以Escherichiacoli高效表达载体pET-29a为基础,将广宿主载体pUCP19中稳定的假单胞菌(Pseudomonas)质粒DNA复制子和自行分离克隆的荧光假单胞菌(P.fluorescens)P303组成型表达启动子PP303 插入其中,分别获得了重组载体pQMV(4.6 kb)和pGMP(5.6 kb)。它们均含有假单胞菌和大肠杆菌复制子、荧光假单胞菌内源强启动子,以及包含8~11个限制性内切酶多克隆酶切位点;此外,载体pGMP还含有绿色荧光蛋白基因gfp作为辅助检测标记。连续培养和继代培养测定,这两种载体在荧光假单胞菌中的稳定性均为100%(120 h)。
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