冠心平片对人血管内皮细胞的保护作用

目的探讨冠心平片抗过氧化氢(H2O2)诱导人血管内皮细胞(VEC)的凋亡作用及可能机制。方法选择新西兰大白兔15只,随机分成正常组、维拉帕米组、冠心平小剂量组、冠心平中剂量组、冠心平大剂量组,每组3只,分别给予生理盐水、维拉帕米缓释片0.02g/kg、冠心平片2.8g/kg、冠心平片5.6g/kg、冠心平片11.2g/kg,用蒸馏水溶解配置灌胃给药,10ml/kg,每天1次,连续3天,末次给药后1h,耳缘静脉采血,制备含药血清。采用100μmol/L浓度H2O2作用于对数生长期的VEC建立细胞凋亡损伤模型,建模同时用不同剂量冠心平含药血清进行干预。处理后收集细胞,进行流式细胞术检测VEC的凋亡率;采用免疫细胞化学法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关联的x基因(bax)与B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(bcl-2)蛋白的表达;采用PCR检测bax与bcl-2 mRNA的相对量。结果与模型组比较,冠心平大剂量组、冠心平中剂量组、维拉帕米组细胞凋亡率明显降低(P<0.05或P<0.01);维拉帕米组、冠心平小剂量组、冠心平中剂量组、冠心平大剂量组bax蛋白面密度、bax/bcl-2平均面密度与模型组比较均显著下降(P<0.05),bcl-2蛋白面密度显著上升(P<0.05或P<0.01),冠心平中剂量组与大剂量组细胞bax/bcl-2比值降低(P<0.05或P<0.01)。结论冠心平含药血清可以拮抗H2O2诱导VEC的凋亡效应,其机制可能与调节凋亡基因bax、bcl-2的表达有关。