猕猴桃模板DNA的提取及RAPD-PCR最佳反应体系的建立

被引：13

作者：

陈万秋

李思光

罗玉萍

陈少风

机构：

[1] 南昌大学生物科学工程系

[2] 南昌大学生物科学工程系南昌

[3] 南昌

来源：

生物技术通报 | 2003年 / 03期

关键词：

猕猴桃; RAPD-PCR; DNA提取;

D O I：

10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2003.03.012

中图分类号：

Q943 [植物细胞遗传学];

学科分类号：

071007 ; 090102 ;

摘要：

以改良CTAB法从猕猴桃叶片中制备模板DNA ,优化了PCR热循环参数 ,建立了RAPD PCR扩增的最佳反应体系。实验结果表明 ,CTAB提取液中EDTA组分的浓度对模板提取影响很大 ,其最适浓度为 80mmol/L ;用异丙醇沉淀后不经乙醇洗涤纯化的DNA不会影响扩增效果。PCR热循环参数为 :94℃预变性 5min ;94℃变性 1min ,37℃退火 1min ,72℃延伸 2min ,循环 4 0次 ;最后在 72℃延伸 6min。

引用

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