人工合成苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因cryIA（c）在大肠杆菌中的表达及对烟草的转化

用化学合成法和分子生物学技术合成了ｃｒｙＩＡ（ｃ）基因编码杀虫蛋白中决定杀虫活性的第２９至６１３氨基酸部分的１７５５ｂｐＤＮＡ。合成中改变了多处ＡＴ富集区和可能引起该基因转录提前终止或引起ｍＲＮＡ不稳定的序列。与野生型基因相比，新合成基因的ＧＣ比例由野生型的３８％增加到４７％，更接近于植物基因的特点。有５２％的氨基酸密码子改变为植物偏爱密码子。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析及虫试结果表明合成的ｃｒｙＩＡ（ｃ）基因在大肠杆菌中能表达产生一个分子量约６５ｋＤ，与原前毒素抗血清有特异免疫反应并与野生型杀虫蛋白有同样杀虫活性的蛋白。构建了合成基因的植物表达载体并通过农杆菌转化了烟草，对所得转基因烟草的初步虫结果表明新合成的基因在植物中的表达水平可能高于野生型基因。