Idaho Rapidcycler PCR仪上用薄壁管进行RAPD扩增的程序优化

被引：2

作者：

甘四明

施季森

白嘉雨

机构：

[1] 南京林业大学林木遗传和基因工程开放实验室!南京

[2] 中国林业科学研究院热带林业研究所

来源：

南京林业大学学报 | 2000年 / 01期

关键词：

Rapidcycler扩增仪; RAPD; 扩增程序;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q946.33 [];

学科分类号：

071001 ;

摘要：

以尾叶桉DNA为材料,对IdahoRapidcycler扩增仪上用薄壁管进行RAPD扩增的程序进行了优化研究。通过逐步对退火、延伸和变性的温度和时间及总的循环次数设置不同梯度和亚梯度,比较不同梯度和亚梯度的扩增结果,确定优化程序为:93℃预变性1min;再40次循环:93℃变性20s,38℃退火21s,72℃延伸1min;最后72℃延伸7min。该程序的扩增时间较短,具有较好的特异性和重复性。另外,薄壁管反应架在反应室的内位比同时扩增的外位效果差,扩增时只能利用外位。

引用

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