多重PCR技术检测儿童下呼吸道感染病毒和不典型病原体的价值

目的:全面了解病毒和不典型病原体在儿童下呼吸道感染（LRTI）病原中的分布,探讨多重PCR技术检测呼吸道病原的临床应用价值。方法:收集2014年1月至2014年12月温州医科大学附属第二医院育英儿童医院992例因LRTI住院的5岁以下患儿的鼻咽分泌物,用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒、流感病毒A、流感病毒B、副流感病毒、腺病毒和衣原体抗原,并提取核酸,采用基于先进片段分析的多重PCR技术测定呼吸道合胞病毒、流感病毒A、流感病毒B、副流感病毒、腺病毒、鼻病毒、博卡病毒、偏肺病毒、冠状病毒和肺炎支原体、衣原体基因。结果:本组患者男662例,女330例,<1岁组587例,1～3岁组287例,3～5岁组118例。多重PCR技术检测结果发现,851例患儿的鼻咽分泌物标本至少存在一种病原阳性（占85.8%）,224份标本（占22.6%）检测到两种或两种以上病原。呼吸道合胞病毒和鼻病毒占所有检测病原的前两位。不同年龄组的病原阳性率分别为84.8%、89.2%和82.2%,组间差异无统计学意义（χ2=4.416,P=0.110）。但<1岁组和1～3岁组的混合感染率均明显高于3～5岁组（χ2=3.963、9.871,P=0.047、0.002）。鼻病毒可见于各年龄段LRTI患儿,而呼吸道合胞病毒则主要见于婴幼儿。和直接免疫荧光法比较,相同病原检出的一致性较好（Kappa=0.615,P<0.01）,但PCR技术病毒的检出率更高（58.37% vs. 41.53%,χ2=56.23,P<0.001）。结论:呼吸道合胞病毒和鼻病毒占本地区5岁以下儿童LRTI主要病毒和不典型病原的前两位,博卡病毒、冠状病毒和偏肺病毒亦可见,肺炎支原体少见;和直接免疫荧光法比较,多重PCR技术有助于全面了解儿童LRTI的病原。