Toll样受体4在大鼠心肌缺血再灌注损伤中表达的实验研究

目的观察心肌缺血再灌注早期 Toll 样受体4 mRNA（TLR4 mRNA）及蛋白表达,探讨TLR4在心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法雄性 SD 大鼠随机分为2组:假手术组（Sham 组）、缺血再灌注组（IR 组）,每组36只,建立大鼠心肌缺血再灌注模型,按照不同的再灌注时间（0、0.5、1、2、4和8 h）处死动物。光镜和电镜观察心肌组织形态及超微结构改变。免疫组化检测心肌 TLR4蛋白表达情况。实时定量逆转录聚合酶链反应定量心肌 TLR4 mRNA 表达水平。酶联免疫吸附试验测定心肌中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。结果 （1）Sham 组心肌组织形态及超微结构改变不明显;IR组心肌损伤较重,缺血心肌恢复血液灌注8 h 内,其病理学变化未见显著改善。（2）Sham 组与 IR 组TLR4蛋白都有阳性表达,IR 组 TLR4表达增加,且以再灌注1 h 最为明显（19.62±3.84,P<0.01）。（3）与 Sham 组比较,IR 组心肌 TLR4 mRNA 表达水平均出现不同程度上调,以再灌注1 h 达到峰值[（4.03±0.85）×10-2,P<0.01],而 Sham 组各时间点未见明显改变。（4）IR 组心肌 TNF-α水平高于各对应时间点 Sham 组（P 均<0.05）,且心肌 TLR4 mRNA 表达与 TNF-α呈正相关（r=0.728,P<0.01）。结论心肌缺血再灌注早期,心肌 TLR4表达迅速上调,TLR4的激活可能通过促进 TNF-α等炎性因子的产生分泌增多来介导心肌缺血再灌注损伤。