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乙型肝炎病毒表面抗原人源单链可变区抗体基因的克隆与鉴定
被引：6
作者：
成军
钟彦伟
施双双
倪勤
夏小兵
董菁
王刚
刘友昭
王琳
刘妍
杨继珍
陈菊梅
机构：
[1] 解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心
[2] 解放军第三○二医院传
来源：
关键词：
噬菌体展示技术;
乙型肝炎病毒表面抗原;
亲和筛选;
噬菌体抗体;
D O I：
暂无
中图分类号：
R512.62 [];
学科分类号：
100401 ;
摘要：
目的 筛选、鉴定抗乙型肝炎病毒 (HBV)表面抗原 (HBsAg)蛋白的人源单链可变区抗体 (ScFv)的编码基因 ,为细胞内表达小分子单链抗体的研究及抗HBV的基因治疗研究奠定基础。方法 采用噬菌体表面展示技术 ,以氯化铯超速离心法纯化的HBsAg蛋白为固相抗原 ,从噬菌体单链可变区抗体半合成库中经过 5轮“吸附 洗脱 扩增”淘洗过程 ,获得抗原结合活性较强的HBsAg人源单链可变区抗体阳性克隆 ,并对其进行免疫检测及序列测定。 结果 筛选得到的ScFv片段编码基因为 789nt,编码的产物由 2 62个氨基酸残基组成 ,具有典型的轻链和重链可变区结构特点以及与HBsAg结合的特异性。结论 利用噬菌体抗体库技术 ,成功地获得了HBsAg人源单链可变区抗体的编码基因 ,并获得了可溶性单链抗体的表达
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