烧伤焦痂毒性物质D1对大鼠肝线粒体H+-ATP酶活性及能量偶联的影响

目的观察烧伤焦痂Ｄ１成分对肝线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶活性及ＡＴＰ生成的影响，以探讨Ｄ１对线粒体呼吸抑制的作用机制。方法制备大鼠肝亚线粒体成分并从烧伤焦痂中提取Ｄ１成分，在含线粒体的反应体系中加入Ｄ１成分，测Ｈ＋－ＡＴＰ酶活性及ＡＴＰ生成量，并检测ＡＮＳ荧光强度以反映线粒体氧化磷酸化偶联状态。结果亚线粒体颗粒ＡＴＰ酶水解活力的正常值为（７．１８±０．０６）μｍｏｌ·ｍｇ １·ｍｉｎ １，与Ｄ１作用后，Ｈ＋－ＡＴＰ酶活力有明显下降，其下降程度和Ｄ１的剂量呈负相关，并且本实验直接观察到在新鲜制备ＳＭＰ中Ｄ１成分，直接抑制了ＡＴＰ的生成。ＡＮＳ荧光强度下降，亦与Ｄ１剂量呈负相关。结论Ｈ＋－ＡＴＰ酶活力下降可能是Ｄ１对线粒体呼吸抑制机制之一，Ｈ＋－ＡＴＰ酶活力下降导致ＡＴＰ生成减少。荧光强度下降反映线粒体氧化磷酸化功能下降。