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基因重组人Gamma-干扰素发酵和提取优化工艺的研究
被引：7
作者：
张耀东
洪深求
张丽华
耿信笃
机构：
[1] 陕西师范大学化学系
[2] 西北大学现代分离科学研究所
来源：
关键词：
干扰素；发酵；菌体破碎；提取；包含体;
D O I：
10.15983/j.cnki.jsnu.1998.02.019
中图分类号：
TQ929.1 [];
学科分类号：
摘要：
对基因重组人Ｇａｍｍａ－干扰素（ｒＩＦＮ－γ）ＰＢＶ２２０ＤＨ５α工程菌株的发酵工艺进行了研究．结果表明，采用在２５０ｍＬ摇瓶中装液量为１５０ｍＬ，按照１∶４０的稀释比进行两次扩大培养，并在大肠杆菌生长最为活跃的对数生长期内进行诱导表达效果最好．收集菌体以后，将菌体进行冷冻和超声破碎，并在２．０ｍｏｌ／Ｌ脲中浸泡８ｈ～９ｈ以清洗杂蛋白，然后用７．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍（Ｇｕ·ＨＣｌ）提取．在优化工艺条件下，ｒＩＦＮ－γ的收量为９．０×１０６ＩＵ／Ｌ～１２．８×１０６ＩＵ／Ｌ，总蛋白为７９．５ｍｇ／Ｌ～１２７．２ｍｇ／Ｌ，比活为５．６×１０５ＩＵ／ｍｇ～８．０×１０５ＩＵ／ｍｇ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳含量可达６０％～８０％，使ＰＢＶ２２０ＤＨ５α工程菌株获得了高效表达．
引用
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