一种土壤微生物总DNA的高效提取方法

被引：59

作者：

黄婷婷

曹慧

王兴祥

崔中利

机构：

[1] 南京农业大学农业部环境微生物工程重点开放实验室,南京农业大学农业部环境微生物工程重点开放实验室,中国科学院南京土壤研究所,南京农业大学农业部环境微生物工程重点开放实验室南京,南京,南京,南京

[2] 中国科学院南京土壤研究所南京

来源：

土壤 | 2004年 / 06期

基金：

中国博士后科学基金;

关键词：

土壤微生物; 总DNA提取; 细胞回收; 粗DNA纯化;

D O I：

10.13758/j.cnki.tr.2004.06.015

中图分类号：

S154 [土壤生物学];

学科分类号：

090301 [土壤学];

摘要：

获得高浓度、大片段、多样性程度高的土壤微生物总DNA 是研究土壤微生物群落结构的分子生态学基础。本文采用间接法(菌体细胞回收法)提取红壤地区两种土壤类型的土壤微生物总DNA,定量计算其回收率,并与直接法(细胞原位裂解法)比较了提取效率和纯度。结果表明:红壤地区2种土壤每克干土的总DNA提取量,间接法约为0.34和0.53礸/g干土,直接法约为13.62和24.32礸/g干土;间接法的提取效率低于直接法,但所得DNA片段较大,且Sau 3AⅠ 酶切和16 S rDNA通用引物PCR扩增结果显示,间接法比直接法更能有效地去除土壤中的某些抑制剂,所得总DNA的纯度更高,有利于后续操作。

引用

页码：662 / 666

页数：5

共 7 条

[1]

重金属复合污染农田土壤DNA的快速提取及其PCR-DGGE分析 [J].