9株鸡毒支原体29Ku多肽基因的克隆与序列分析

根据已发表的鸡毒支原体(MG)S6株29Ku多肽基因序列设计了1对引物,以9株(广西分离株5株、标准株4株)DNA为模板进行PCR扩增,均得到802bp的特异性片段,将9株MGPCR产物纯化后克隆到pMD18＿T载体上,得到重组质粒。重组质粒经PCR法和EcorⅠ、SalⅠ双酶切等方法鉴定后,测定了9株29Ku多肽基因序列,并在基因库中S6标准株的29Ku多肽基因序列进行分析比较。结果表明,5株分离株与5株标准株29Ku多肽基因核苷酸序列同源性分别为94 4%～99 9%,推导的氨基酸同源性分别为89 7%～99 2%。从各毒株的进化分析表明,5个分离株与标准强毒株S6、A5969、K1501和PG31强毒株间遗传距离较近,而5个分离株与标准株F疫苗株间遗传距离则较远。