从ERα/RANK通路探讨淫羊藿苷抑制破骨细胞分化作用

目的:通过检测淫羊藿苷对破骨细胞诱导分化过程中雌激素受体α（estrogen receptorα,ERα）,核转录因子-κB受体（receptor activator of nuclear factor-κB,RANK）mRNA表达的影响,探讨淫羊藿苷抑制破骨细胞分化作用机制。方法:50μg·L-1核因子κB受体活化因子配体（receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL）体外诱导RAW264.7细胞分化成破骨细胞,利用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色和骨吸收陷窝对破骨细胞进行鉴定。用不同浓度的淫羊藿苷(1×10-5,1×10-6,1×10-7mol·L-1)分别处理5 d和9 d后,进行TRAP染色和骨吸收陷窝分析,处理6 d后,利用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）,组织蛋白酶K（cathepsin-K,CK）,TRAP,ERα,RANK mRNA表达水平,用雌激素受体阻断剂ICI182780阻断雌激素受体通路验证淫羊藿苷对ERα/RANK通路的调节作用。结果:与RANKL诱导组比较,淫羊藿苷可以显著抑制破骨细胞形成数量和骨吸收陷窝数（P<0.05,P<0.01）,同时显著下调破骨细胞MMP-9,CK,TRAP,RANK mRNA表达水平（P<0.05,P<0.01）,上调ERαmRNA表达水平（P<0.05）。ICI182780可抑制淫羊藿苷上调破骨细胞的ERαmRNA表达水平和下调RANK mRNA表达水平的作用（P<0.05）。结论:淫羊藿苷能抑制RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化和骨吸收活性,该作用可能通过上调破骨细胞的ERαmRNA表达进而下调RANK mRNA表达实现的。