流式细胞术检测细胞毒方法的建立

被引：24

作者：

王晓祺

谭岩

段秀梅

刘玲丽

方艳秋

姜艳芳

许淑芬

刘力华

机构：

[1] 吉林大学第一医院中心研究室,吉林大学第一医院中心研究室,吉林大学第一医院肿瘤生物治疗中心,吉林大学第一医院中心研究室,吉林大学第一医院中心研究室,吉林大学第一医院中心研究室,吉林大学第一医院中心研究室,吉林大学第一医院肿瘤生物治疗中心长春,长春,长春,长春,长春,长春,长春,长春

来源：

中国免疫学杂志 | 2004年 / 10期

关键词：

流式细胞术; 细胞毒; CFSE;

D O I：

暂无

中图分类号：

R-331 [实验方法与设备];

学科分类号：

100234 [放射肿瘤学];

摘要：

目的 :建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法。方法 :用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞 ,再用碘化丙碇 (PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞。效靶比为 10 0∶1～ 6 2 5∶1,共孵育时间为 1～ 6小时 ,流式细胞仪收集 10 0 0个靶细胞并测定被杀细胞的百分率。结果 :CFSE是合适的标记靶细胞的荧光染料 ,18小时后也能很好地区分效靶细胞 ;靶细胞的自然死亡率低于 5 % ;杀伤百分率随着效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为5 0∶1～ 2 5∶1,共孵育时间为 2～ 4小时。结论 :CFSE PI双荧光染料标记的流式细胞分析检测细胞毒具有多个优点 :避免放射性试剂的应用 ,敏感性增强 ,单细胞水平的分析。

引用

页码：704 / 707

页数：4