薯蓣皂甙对骨髓间充质干细胞凋亡保护的研究

目的:研究缺血条件下薯蓣皂甙预处理对骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡的影响,探讨中药穿山龙作为MSCs移植治疗缺血性心肌病辅助治疗的可行性。方法:采用无血清方式诱导MSCs凋亡。实验分5组:对照、无血清、低、中、高剂量干预组。分别采用终浓度为4mg·mL-1,40mg·mL-1,400mg·mL-1薯蓣皂甙预处理第4代MSCs,24h后更换无血清DMEM饥饿48h,TUNEL标记细胞凋亡;细胞免疫组化染色检测Bcl-2蛋白水平表达;RT-PCR检测凋亡抑制基因Bcl-2mRNA表达。结果:TUNEL标记阳性细胞率按对照组、低、中、高剂量组、无血清组依次升高,除后两组,其余各组间差异有统计学意义;无血清干预48h后,Bcl-2蛋白表达增加,低、中剂量薯蓣皂甙预处理可进一步提高Bcl-2表达,但高剂量干预组与无血清组间无统计学差异(P=0.631);对照组Bcl-2mRNA表达显著低于各组(均为P<0.001),而高剂量干预组与无血清组间无差异(P=0.67);低剂量干预组Bcl-2基因片段mRNA表达最高,中剂量干预组次之,提示无血清条件下可提高Bcl-2基因表达,低、中剂量的薯蓣皂甙预处理可提高无血清诱导的MSCs的Bcl-2基因表达,但高剂量薯蓣皂甙预处理则无此作用。结论:适当剂量薯蓣皂甙预处理能使缺血条件下MSCs凋亡减少,使抗凋亡基因Bcl-2基因及蛋白表达增加。