编码鸡IL-18成熟蛋白基因的分子克隆与序列测定

被引:24
作者
潘蔚绮
刘胜旺
孔宪刚
李广兴
夏春
机构
[1] 东北农业大学动物医学院
[2] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
[3] 中国农业大学动物医学院 黑龙江
[4] 哈尔滨
[5] 黑龙江
基金
国家高技术研究发展计划(863计划);
关键词
鸡IL-18; 克隆; 序列测定;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
白细胞介素 18(IL18)是一种能诱导IFNγ产生的新型细胞因子 ,在调节Th1型细胞免疫应答中起重要作用。本研究根据已发表的鸡白介素 18(IL18)cDNA基因序列设计引物 ,用反转录_聚合酶链反应 (RTPCR)技术从有丝分裂原ConA刺激 4 8小时活化的白来航鸡脾细胞中扩增出编码鸡IL18成熟蛋白质的基因 ,并进行序列测定 ,并与结果进行了比较 ,发现本研究克隆到的鸡IL18成熟蛋白编码基因序列在 4 82位为C ,而Schnieder等报道的序列为T ,这一核苷酸序列的变化导致了推导的对应氨基酸残基由苯丙氨酸变为丝氨酸。该处碱基变化的原因究竟是鸡IL18本身存在多态性 ,还是反转录或PCR过程中的碱基错配所致 ,该处碱基的变化对于鸡IL18蛋白的表达及其生物活性究竟有无影响等问题正在研究中。该基因为国内首次报道经序列测定证实的鸡IL18基因 ,为进一步体外表达鸡IL18蛋白并深入研究其功能奠定了基础
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相关论文
共 2 条
[1]   应用反转录聚合酶链式反应检测鸡Th1样淋巴因子mRNA表达的研究 [J].
刘胜旺 ;
孔宪刚 ;
陈洪岩 ;
张宝山 ;
刘永刚 ;
童光志 ;
卢景良 .
中国预防兽医学报, 2000, (01) :49-52
[2]  
分子克隆实验指南.[M].(美)J.萨姆布鲁克(J.Sambrook)等著;金冬雁等译;.科学出版社.1992,