目的建立反相高效液相色谱法测定银杏叶片样品中总黄酮醇苷(槲皮素、山柰素、异鼠李素)的含量测定方法。方法采用phenomenex C18色谱柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(5050),流速为1.0ml/min,检测波长为360nm,柱温:25℃。结果总黄酮醇苷中槲皮素在与山柰素在0.0075~0.06mg/ml(r=0.9999,n=5)、异鼠李素在0.005~0.04mg/ml(r=0.9995,n=5)浓度范围内具有较好的线性关系;平均加样回收率槲皮素为99.92%(RSD=1.65%,n=6),山柰素为98.60%(RSD=1.3%,n=6),异鼠李素为99.41%(RSD=0.81%,n=6)。结论该法操作简便、灵敏度高、重现性好,可用于银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定。