用RACE结合cDNA文库筛选的方法获取新的锌指蛋白基因

被引：9

作者：

杜占文

刘立仁

张俊武

机构：

[1] 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室,中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室,中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京

来源：

遗传 | 2002年 / 03期

基金：

高等学校博士学科点专项科研基金;

关键词：

基因克隆; 快速扩增cDNA末端(RACE); 非同源DNA序列; cDNA文库筛选;

D O I：

10.16288/j.yczz.2002.03.026

中图分类号：

Q784 [基因的重组];

学科分类号：

摘要：

大多数有重要功能的蛋白质都含相应的由保守氨基酸顺序组成的功能结构域。本文首先根据蛋白质功能结构域保守氨基酸序列设计简并引物 ,用PCR方法扩增出基因EST序列 ,再利用改进的快速扩增cDNA末端(RACE)方法从cDNA文库中扩增出基因非同源部位 ,然后以非同源序列为探针 ,筛选cDNA文库。利用此方法成功地从人骨髓cDNA文库中克隆到几个编码锌指蛋白并代表原有EST的新的全长cDNA。这一策略也应适用于筛选编码具有其他序列保守性功能结构域蛋白的基因。

引用

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