柿属植物ISSR分析技术的建立

以部分柿属（Diospyros）植物为材料,对 ISSR-PCR 反应体系的 Mg2+、dNTPs、引物、模板 DNA 和 Taq DNA 聚合酶浓度,退火温度及扩增循环次数进行了探讨,确立了适合柿属植物 ISSR 分析技术体系:在25μL 反应体系中,含1Buffer,Mg2+2.0或2.5 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.6μmol/L,Taq DNA 聚合酶 1U,甲酰胺2%,模板 DNA 2.4 ng/μL;PCR 扩增程序:94℃变性3 min;94℃ 30 s,（Tm+2）℃（根据引物不同设定）45 s,72℃1.5 min,35个循环;72℃延伸7 min;2%琼脂糖电泳分离 PCR 产物。结果为柿属植物遗传多样性和分子系统学研究提供技术支持。