单核细胞增多性李斯特菌hlyA基因序列及溶血素活性测定

被引:5
作者
谭炳乾 [1 ,2 ]
何启盖 [2 ]
肖军 [1 ]
陈焕春 [2 ]
机构
[1] 襄樊出入境检验检疫局
[2] 华中农业大学农业微生物国家重点实验室
关键词
单核细胞增多性李斯特菌; hlyA; 李斯特菌溶血素O; 溶血活性;
D O I
10.16303/j.cnki.1005-4545.2009.02.003
中图分类号
S852.61 [病原细菌];
学科分类号
摘要
从3株不同来源的单核细胞增多性李斯特菌中PCR扩增溶血素编码基因hlyA,连接到T克隆载体转化到受体菌DH5α中,经菌落PCR和提取质粒酶切鉴定后测序,对测定的hlyA基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分析,结果表明,从3个菌株克隆的hlyA基因具有完整的开放阅读框,同源性在96.9%以上;其推导的LLO氨基酸序列同源性在97.9%以上,N端存在相同的PEST基序,C端存在相同的保守性11肽结构。建立和运用分光光度法对3个试验菌株的溶血素活性进行了检测,结果表明,在pH5.6时LLO溶血活性最高,在pH7.0时LLO溶血活性基本丧失。本试验单核细胞增多性李斯特菌的流行病学分析和基因工程疫苗载体研究提供了依据。
引用
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