反相高效液相层析在糖化白蛋白肽段分离纯化中的应用

被引:2
作者
梁逊
李顺子
李文兰
机构
[1] 南开大学化学系
[2] 南开大学吸附分离功能高分子材料国家重点实验室
关键词
反相高效液相层析,糖化白蛋白,糖化赖氨酸;
D O I
暂无
中图分类号
Q516.03 [];
学科分类号
摘要
采用一种简单的“甲醇 水 三氟醋酸”作为洗脱体系的反相高效液相层析(简称RP HPLC)对通过固相合成方法合成的糖化白蛋白肽段进行了分析鉴定和分离纯化.使用酸敏性PEG载体,Fmoc保护化学法合成了白蛋白八肽NH2 Lys Gln Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys COOH.对其N端Lys进行糖化反应后,经SephadexG 10柱色谱纯化后,通过RP HPLC分析,证明得到了糖化八肽的单一峰.使用Merrifield树脂,Boc保护化学法合成了白蛋白七肽NH2 Gln Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys COOH.通过RP HPLC半制备分离提纯后,得到了所需的肽段.对Nα Boc Lys的ε氨基进行糖化反应后,经RP HPLC分析,证明得到了比较纯的糖化赖氨酸,与纯化后的白蛋白七肽偶联后,通过RP HPLC分析,得到了偶联产物———糖化八肽的单一峰.
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