可溶酸性胶原的制作与临床应用

本文自制的猪皮可溶酸性胶原,经UV—3000紫外分光光度计测定,其最大吸收光谱为225nm;用SDS—PAGE凝胶园盘电泳测定其分子量,低于人体血清白蛋白;经氨基酸分析,该胶原的甘氨酸含量为37％,脯氨酸为14％。应用猪皮可溶酸性胶原作底物培养表皮细胞的成功率为90％,而用玻璃平皿仅为8.6％,二者相比p<0.001。实验证明可溶酸性胶原培养表皮细胞的理想浓度为0.33～1mg/ml,每60cm2平皿加入2ml最好。在胶原上培养成功的表皮细胞片,电镜观察胶原与表皮细胞之间有基底膜形成。培养29天的表皮细胞片组织切片,HE染色有8—0层表皮细胞。在四氟乙烯膜上涂胶原培养成功的表皮细胞片,便于移植。当细胞连片时,可将四氟乙烯膜从平皿中取出,既可防止刮膜时的机械损伤,而又不用DispaseⅡ酶分离取膜,从而防止表皮片皱褶和缩小。由于用四氟乙烯膜和胶原作底物,移植时间可提早到培养后5～13天,此时正处于基底细胞增殖期,DNA含量较高,移植容易成活。移植后28～30天,局部可以上皮化,经组织切片证明有完整表皮层。