人脾脏树突状细胞大量培养的新方法

目的 :建立人脾脏单核细胞体外培养生成大量树突状细胞的新方法。　 方法 :人脾脏细胞悬液培养2h获得贴壁的单核细胞 ,加入重组人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF) 10 0 μg/L或rhGM CSF 10 0 μg/L +重组人白细胞介素 4(rhIL 4) 5 0 0kU/L ,体外培养 7天 ,收集悬浮细胞 ,以流式细胞仪分析细胞表型及抗原内吞能力 ,体外混合淋巴细胞反应检测细胞抗原呈递功能。　 结果 :以细胞因子培养 7天生成的悬浮细胞 ,2 0 %～ 80 %表达树突状细胞 (DC)特异性标志CD1a ,表达高水平的HLA DR、B7 1、B7 2分子 ,具有较强的抗原内吞能力 ,体外可以强烈刺激同种T细胞增生 ,其形态、表型、功能与人外周血单核细胞培养获得的DC相似。　 结论 :从人脾脏获得的贴壁的单核细胞 ,体外以rhGM CSF +rhIL 4培养 ,可以获得极其大量的DC(>10 9细胞 /个脾脏 ) ,为进一步研究和应用打下了基础。