枯草芽孢杆菌B034拮抗蛋白的分离纯化及特性分析

被引:50
作者
童有仁
马志超
陈卫良
李德葆
机构
[1] 浙江农业大学生物技术研究所
基金
浙江省自然科学基金;
关键词
枯草芽孢杆菌B034,拮抗蛋白,水稻白叶枯病,分离纯化;
D O I
10.13343/j.cnki.wsxb.1999.04.008
中图分类号
S435.111 [病害];
学科分类号
摘要
枯草芽孢杆菌(Bacilussubtilis)B034分离自水稻叶面,对水稻白叶枯病菌具有较强的拮抗能力。除去菌体培养液以70%饱和度硫酸铵沉淀所得的拮抗物粗提液对热稳定,对胰蛋白酶不敏感,对蛋白酶K、链霉蛋白酶E部分敏感,对氯仿部分敏感,其作用的活性pH范围低至4,高至12以上,比较耐碱性。粗提液经Phenyl SepharoseCL 4B柱层析、DEAE Sephacel柱层析和HPLC的Superdex75HR10/30柱层析,得到二个拮抗活性峰:P1和P2。P2经SDS PAGE和PAGE IEF电泳显示为单一蛋白带,分子量503kD,等电点625。自动Edman降解法从P2的N端测出残基序列为Ile Ser Asn Pro X Ile Asp Val
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[1]  
Benkerroum N,Ghouati Y,Sandine W E et al. Applied Microbiology . 1993