实时荧光定量PCR法检测转基因小鼠拷贝数

被引：27

作者：

王晓建 ^{[1
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杨旭 ^{[1
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宋晓东 ^{[1
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张禅那 ^{[1
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刘继斌 ^{[1
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邸冉 ^{[2
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张连峰 ^{[2
]}

惠汝太 ^{[1
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机构：

[1] 中国医学科学院阜外心血管病医院心血管病相关基因与临床研究教育部重点实验室(中德实验室)

[2] 中国医学科学院实验动物研究所分子遗传中心

来源：

中国实验动物学报 | 2007年 / 03期

基金：

北京市自然科学基金;

关键词：

转基因; 拷贝数; 实时定量PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

目的利用实时荧光定量PCR法鉴定转基因小鼠外源基因插入拷贝数。方法以TG-CARK转基因首见鼠为研究对象,选取小鼠的高度保守基因Fabpi为内参,利用绝对定量的实时荧光PCR法鉴定转基因小鼠拷贝数,并与传统的Southern blot方法的定量结果进行比较。结果实时定量PCR鉴定的转基因拷贝数与Southernblot法完全一致,三只TG-CARK首见小鼠的拷贝数分别为1,7,45。结论实时定量PCR技术具有高准确性、高稳定性、高通量和低成本的优点,是比传统杂交技术更好的鉴定小鼠转基因拷贝数的方法。

引用

页码：170 / 174

页数：5

共 4 条

[1]

Absolute quantification of mRNA using real-time reversetranscription polymerase chain reaction assays. Bustin SA. J MolEndocrinol . 2000

[2]

Quantification of low-copytranscripts by continuous SYBR Green I monitoring duringamplification. Morrison TB,Weis JJ,Wittwer CT. Biotechniques . 1998

[3]

Isolation andcharacterization of the mouse cardiac myosin heavy chain genes. James AS,Gulick S,Neumanna J,et al. Journal of Biological Chemistry . 1991

[4]

Quantitative real-time PCR assayfor determining transgene copy number in transformed plants. Ingham DJ,Money S,Hansen G. Biotechniques . 2001

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