牛奶黄嘌呤氧化酶的纯化及性质研究

被引：6

作者：

张尔贤

林文华

俞丽君

肖湘

机构：

[1] 汕头大学生物学系!汕头

[2] 不详

来源：

汕头大学学报(自然科学版) | 1998年 / 01期

关键词：

牛奶; 黄嘌呤氧化酶; 磷酸钙凝胶; 纯化; 性质;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q55 [酶];

学科分类号：

摘要：

本文建立从牛奶中分离纯化黄嘌呤氧化酶的工艺，该工艺采用正丁醇-硫酸铵分级提取、磷酸钙凝胶吸附、SephadexG-150层析纯化获得纯品．从磷酸钙凝胶上解吸到的XOD粗酶比活性达5．096I．U／mg－pr，提纯340倍，产率达74．3％．每单位粗酶的吸附剂用量以6mg为最佳．纯酶的最大紫外吸收在285nm处，酶活性测定的最适pH在8．60～10．15之间，最适温度在25℃～35℃间．1mol／LKCN、1．5％H2O2及甲醇对酶活力都有明显的抑制作用．经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示两条蛋白带．经黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-Luminol（XOD－X－Luminol）发光体系检测结果表明20μl牛奶XOD（相当0．181．UXOD）的发光强度最大，其发光值受抑制50％的超氧化物歧化酶（SOD浓度（IC50）为1．14μg／ml（相当0．514USOD）．

引用

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