携带丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因的重组腺病毒构建研究

被引:2
作者
周陶友
陈敏
李卫华
赵连三
何芳
刘丽
唐红
机构
[1] 四川大学华西医院,四川大学华西医院,四川大学华西医院,四川大学华西医院,四川大学华西医院,四川大学华西医院,四川大学华西医院四川成都,四川成都,四川成都,四川成都,四川成都,四川成都,四川成都
关键词
丙型肝炎病毒; 非结构蛋白3; 重组腺病毒疫苗; 基因治疗;
D O I
暂无
中图分类号
R346 [];
学科分类号
摘要
目的构建表达丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)的复制缺陷型重组腺病毒,为防治HCV感染的基因免疫和基因治疗提供实验基础。方法将HCV NS3基因定向克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,经与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在大肠埃希菌BJ5183内同源重组后,转染293细胞进行包装,并反复感染293细胞进行扩增。结果通过PCR扩增、酶切、核酸测序及Western杂交法检测鉴定,均证实插入穿梭质粒中的片段为HCV NS3基因(基因型1b);所包装出的复制缺陷型重组腺病毒AdEasy-GFP-NS3具有良好的感染能力,并可在293细胞中表达HCV NS3蛋白。结论AdEasy-GFP-NS3携带有HCV NS3基因,能有效地感染293细胞并高效表达,从而为丙型肝炎基因疫苗的进一步研究奠定了基础。
引用
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共 4 条
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