黄芪甲苷单克隆抗体的制备及鉴定

被引:9
作者
于生兰 [1 ,2 ]
欧阳臻 [1 ]
徐加兵 [3 ]
王帅兵 [2 ]
机构
[1] 江苏大学食品与生物工程学院
[2] 江苏农牧科技职业学院
[3] 江苏大学药学院
关键词
黄芪甲苷; 单克隆抗体; 酶联免疫吸附测定;
D O I
10.16333/j.1001-6880.2013.11.022
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100108 [医学免疫学];
摘要
人工合成黄芪甲苷(AstragalosideⅣ,简称AST)的免疫抗原AST-BSA(黄芪甲苷-牛血清白蛋白)和包被抗原AST-OVA(黄芪甲苷-卵清白蛋白),以AST-BSA为免疫原,分5次免疫Balb/C小鼠,取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,HAT筛选,有限稀释法克隆。建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用间接ELISA和间接竞争ELISA(酶联免疫吸附测定)法分别检测抗体效价和特异性。结果免疫小鼠血清抗体效价达1∶27000,获得两株稳定分泌抗AST单克隆抗体的细胞株,分别命名为1D5和3D11,以3D11细胞株制备的单抗检测AST显示在0.01~1μg/mL呈线性关系,检测范围达50~300 ng/mL,制备的单抗可用于AST含量的检测。该方法有望用于AST免疫检测试剂的研制开发。
引用
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