抗菌肽CP10A在大肠杆菌中的融合表达

被引:5
作者
罗永平
张惠文
王小刚
徐明恺
苏振成
张成刚
机构
[1] 中国科学院沈阳应用生态研究所
关键词
CP10A; 克隆; 大肠杆菌; 表达; 纯化;
D O I
10.13523/j.cb.20080722
中图分类号
Q786 [基因的表达];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
CP10A是一种由抗菌肽Indolicine经过序列改造,且对多数革兰氏阳性病源细菌具有较强抗菌活性的多肽序列。研究根据已报道的CP10A氨基酸序列,兼顾大肠杆菌密码子偏好性,设计CP10A的核苷酸序列,利用PCR技术合成相应的DNA序列,后克隆构建重组表达载体pET32a(+)-CP10A,转入大肠杆菌AD494菌株。经IPTG诱导表达和15%SDS-PAGE电泳检测后发现产物以包涵体形式存在,且融合表达量占总蛋白的50%。在变性条件下经Ni-NTA亲合柱层析及复性,最终获得了较高纯度的可溶性重组蛋白。研究首次实现了CP10A抗菌肽在大肠杆菌中的融合表达,为进一步研究其生物学活性及应用奠定了一定的基础,同时也为研究抗菌肽表达提供了一种方法。
引用
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