联合应用活体染料CFDA-SE和SNARF-1检测混合淋巴细胞反应

被引：6

作者：

肇静娴 ^{[1
]}

曾耀英 ^{[1
]}

刘毅 ^{[2
]}

何贤辉 ^{[1
]}

机构：

[1] 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

[2] 中国医学科学院中国协和医科大学皮肤病研究所

来源：

细胞与分子免疫学杂志 | 2006年 / 03期

基金：

国家自然科学基金重点项目; 广东省自然科学基金;

关键词：

CFDA-SE; SNARF-1; 混合淋巴细胞反应; 增殖;

D O I：

10.13423/j.cnki.cjcmi.003928

中图分类号：

R392 [医学免疫学];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的建立一种能够对单向混合淋巴细胞反应中应答细胞的应答强度进行更全面评价的增殖检测方法。方法BALB/cJ小鼠淋巴结细胞经CFDA-SE标记后作为应答细胞,BALB/cJ或C57BL/6小鼠脾细胞经丝裂霉素C处理后再用SNARF-1标记,作为刺激细胞,进行混合培养。混合培养96h后收获细胞,用流式细胞术进行检测,分析SNARF-1-CFSE+应答细胞的增殖情况,并用ModFitTM软件拟和以获得更多增殖相关指数。结果随着应答细胞分裂代数的增加,CFSE荧光强度逐渐减弱直至与刺激细胞无法分开,通过划除SNARF-1阳性细胞以确定应答细胞,解决了这一问题。应用ModFitTM软件,获得应答细胞的前体频率和增殖指数等多项重要的增殖相关指标。结论联合应用CFSE和SNARF-1染色,结合流式细胞术,可作为评价混合淋巴细胞反应中应答细胞的应答强度的有力工具。

引用

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页数：4