油茶种子cDNA文库的构建

被引:47
作者
胡芳名
谭晓风
石明旺
乌云塔娜
机构
[1] 中南林学院经济林育种与栽培国家林业局重点实验室
关键词
林学; 经济林; 油茶; cDNA; 文库构建;
D O I
10.14067/j.cnki.1673-923x.2004.05.001
中图分类号
S794.4 [油茶]; S722.33 [];
学科分类号
摘要
以湘林1号和湘林4号油茶优良无性系近成熟种子为材料,采用裂解法和改良的CTAB法提取总RAN;用磁珠法分离得到纯化的mRNA;在反转录酶和其他酶的作用下合成一链cDNA和二链cDNA;经与质料载体重组和转化大肠杆菌,成功地构建了世界上第一个油茶种子cDNA文库.经检测,文库存容量达106,重组率为88.21%.测序结果表明:克隆片段长度一般都大于600bp,说明构建的文库质量较高,能够满足ESTs文库构建及从文库中分离筛选重要基因等研究工作的需要,为进一步研究奠定了很好的物质和技术基础.
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