用基因枪法将GUS基因导入烟草脱外壁花粉及其瞬间表达

以β—葡糖苷酸酶（β—ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ，ＧＵＳ）基因作为报告基因，用基因枪法将其导入烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＬ．）脱外壁花粉和作为对照系统的完整花粉，探讨了启动子及不同轰击条件对外源基因瞬间表达的影响，比较了二者的转化频率。结果表明：玉米花粉特异启动子能启动ＧＵＳ基因在脱外壁花粉和完整花粉中表达，而ＣａＭＶ３５Ｓ启动子则不能。靶距离越近，着弹率越高，ＧＵＳ基因瞬间表达频率越高；当进气压力为９００ｐｓｉ（ｐｏｕｎｄｓｐｅｒｓｑ．ｉｎ．）、靶距为６ｃｍ时，脱外壁花粉的瞬间表达频率达最高，为０．４５％，约为完整花粉的６倍。表达的蓝色反应花粉经ＤＡＰＩ荧光染色后细胞学观察表明，金粉粒能够打入营养核和生殖核。