家蚕胞质肌动蛋白基因启动子的克隆及piggyBac转座子表达载体的构建

被引：6

作者：

李维

王宇

张世英

朱玲巧

黄敏

刘辉芬

机构：

[1] 四川师范大学化学与生命科学学院

[2] 四川天友生物科技股份有限公司成都

[3] 成都

来源：

农业生物技术学报 | 2003年 / 02期

关键词：

家蚕; 胞质肌动蛋白基因启动子; 转座子piggyBac; 表达载体;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

利用PCR方法从家蚕(Bombyxmori)总DNA中克隆到细胞质肌动蛋白基因(cytoplasmicactin)启动子片段,序列分析表明,该片段中含有典型的组成型表达的细胞质肌动蛋白基因A3(BmA3)调控序列:SRE元件(serumresponseelement)和ActE1元件(activeelement1)。该序列的核苷酸序列与来自欧洲的一个家蚕品种的序列同源性为94%。通过多次重组,将A3启动子片段(不含信号肽序列)与转座子piggyBac的转座酶编码区融合构建成辅助质粒;将其(含信号肽序列和部分编码区)与报告基因多管水母绿色荧光蛋白基因gfp融合,插入到人工合成的转座子piggyBac两反向重复末端序列之间,进而构建成基于转座子piggyBac的转基因载体。研究中构建的转座子转基因载体仅6.4kb,并在两反向重复末端序列之间设计了1个多克隆位点区,便于目的基因的插入。

引用

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