RNAi抑制肝星状细胞TIMP-1基因表达及对细胞生物学行为的影响

被引:5
作者
徐华锋
邹海峰
林平
刘鑫
刘秀萍
于晓光
机构
[1] 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室
关键词
RNAi; 基质金属蛋白酶组织抑制因子-1; 肝星状细胞; 细胞凋亡;
D O I
10.16605/j.cnki.1007-7847.2007.04.012
中图分类号
R346 [];
学科分类号
摘要
研究了siRNA对大鼠肝星状细胞(CFSC)TIMP-1基因表达及对细胞生物学行为的影响.用RT-PCR方法获得带有T7启动子的TIMP-1全基因序列,体外转录法获得TIMP-1dsRNA,Dicer酶切后得到siRNA,用质脂体将siRNA转染至CFSC,RT-PCR检测TIMP-1 mRNA的表达,MTT方法检测细胞生长,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果成功获得TIMP-1 siRNA,将TIMP-1 siRNA转染至CFSC12、24、48h后,与对照相比,TIMP-1 mRNA的表达逐渐下降,经Quanity One(BIO-RAD,USA)分析后,其抑制率分别为49.18%、58.72%和64.73%;siRNA转染CFSC细胞后,CFSC生长受到抑制,细胞凋亡不明显.实验结果表明体外转录法得到的siRNA能有效地降低大鼠CFSC中TIMP-1的表达,明显抑制CFSC的增殖,但不直接引起CFSC的凋亡.
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