超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱同时测定樟芝菌粉中6个核苷类化合物及其指纹图谱研究

目的:建立超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)同时测定樟芝菌粉中尿嘧啶、胞苷、腺嘌呤、鸟苷、胸苷和腺苷6个核苷类成分及其指纹图谱的分析方法。方法:采用Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以甲醇-5 mmol·L-1醋酸铵溶液(pH 8.5)为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,检测波长为254 nm,柱温为30℃。在电喷雾正离子模式下,输入各化合物的分子离子质量数得到相应的提取离子色谱图,以色谱峰面积进行定量分析;以腺苷为参照物,测定其指纹图谱,并作相似度评价。结果:尿嘧啶、胞苷、腺嘌呤、鸟苷、胸苷和腺苷的浓度分别在0.3571～35.71μg·mL-1(r=0.9993)、0.2032～20.32μg·mL-1(r=0.9995)、0.0601～6.01μg·mL-1(r=0.9998)、1.6160～161.60μg·mL-1(r=0.9996)、0.4809～48.09μg·mL-1(r=0.9998)、0.5988～59.88μg·mL-1(r=0.9993)范围内与各自峰面积值呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为106.7%、103.3%、98.8%、94.6%、97.1%、102.6%,RSD分别为3.9%、5.3%、5.7%、4.8%、6.4%、4.8%;初步建立了以9个共有峰为特征指纹信息的樟芝菌粉UPLC-MS提取离子流(EIC)指纹图谱。结论:该定量方法快速、准确,所建立的提取离子流指纹图谱专属性强,两者结合可实现对樟芝菌粉内在质量的综合评价和较全面控制。