不吸水链霉菌梧州新亚种基因文库的构建

被引：7

作者：

初兆娴 ^{[1
]}

孟宪志 ^{[2
]}

桓明辉 ^{[2
]}

陈飞 ^{[2
]}

关艳丽 ^{[2
]}

机构：

[1] 沈阳农业大学

[2] 辽宁省微生物科学研究院

来源：

微生物学杂志 | 2007年 / 05期

关键词：

不吸水链霉菌梧州新亚种; 基因文库; pUC18质粒载体;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

以不吸水链霉菌梧州新亚种为材料,提取的总基因组经Sau3AI不完全酶切,回收3～9 kb DNA酶切片段,用T4连接酶将回收片段按一定比例与经BamHI酶切、南极热敏磷酸酶去磷酸化处理后的pUC18质粒载体连接,热激法转化受体菌E.coliDH5α,在含有IPTG/X-gal和Amp+的LB平板上筛选重组子,所得克隆数为9×103个,以不吸水链霉菌染色体基因组大小为7 Mb计算,概括了不吸水链霉菌梧州新亚种约99%的基因组,达到了建库要求的理论值。随机挑取白色菌落,提取重组质粒进行酶切电泳分析,均有外源片段插入。基因文库的构建,为进一步深入研究梧宁霉素生物合成基因结构及功能奠定基础。

引用

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页数：4

共 5 条

[1]

分子克隆实验指南.[M].(美)J.萨姆布鲁克(JosephSambrook);(美)D.W.拉塞尔(DavidW.Russell)著;黄培堂等译;.科学出版社.2002,

[2]

微生物次级代谢产物生物合成基因簇与药物创新 [J].