共 4 条
中国钩端螺旋体强毒株017膜蛋白基因的质粒载体构建及表达
被引：6
作者：
晏菊芳
鲍朗
伍卫华
万波
李胜富
机构：
[1] 华西医科大学钩端螺旋体病研究室
来源：
关键词：
钩端螺旋体属,细菌外膜蛋白质类,重组质粒,基因表达;
D O I：
暂无
中图分类号：
R377.5 [];
学科分类号：
100103 ;
100705 ;
摘要：
目的构建表达我国钩体强毒赖型０１７株外膜蛋白的重组质粒。方法用ＰＣＲ方法扩增并回收０１７株钩体外膜蛋白基因片段ＯｍｐＬ１，将其与质粒ｐＢＫ－ＣＭＶ重组，通过菌落颜色和酶谱分析筛选出重组质粒。然后从该重组质粒切下ＯｍｐＬ１基因片段，重新克隆至质粒ｐＢＶ２２０中，酶谱分析和ＤＮＡ杂交鉴定出正向重组质粒。将含有正向重组质粒的宿主菌诱导表达生长后，提取全菌总蛋白进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析。结果筛选出４个与ｐＢＶ２２０正向重组的质粒，其中一株带重组质粒ｐＢＬＭ１的菌株表达了一相对分子质量为３３．５×１０３的新蛋白。结论重组质粒ｐＢＬＭ１的构建和表达成功说明扩增得的ＯｍｐＬ１基因具有完整的阅读框架，并使简便获得大量天然的０１７株钩体ＯｍｐＬ１蛋白成为可能，为新型钩体疫苗的研究奠定了基础
引用
收藏
页码：33 / 36
页数：4
相关论文