磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶的克隆及在大肠埃希菌中的表达

被引:3
作者
赵文然
周令望
刘艺
钟学宽
机构
[1] 哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心克山病研究所,哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心克山病研究所,哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心克山病研究所,哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心克山病研究所,,,
关键词
磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶; 克隆; 点突变; 表达;
D O I
暂无
中图分类号
Q55 [酶];
学科分类号
070307 [化学生物学];
摘要
目的在大肠埃希菌中表达磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(phospholipidhydroperoxideglutathioneperoxidase,PHGPx),以期用于抗PHGPx抗体的制备。方法用特异引物从基因文库中扩增出PHGPxcDNA,与表达载体重组,转化大肠埃希菌。重组体中的PHGPx经点突变作用,编码硒半胱氨酸的密码子UGA变为编码半胱氨酸的UGU。结果序列分析表明,克隆载体中包含PHGPx的完整编码序列及3'未翻译区序列;经SDS鄄PAGE及WesternBlot证实PHGPx在大肠埃希菌中获得了成功表达。结论突变的PGPGx可以在大肠埃希菌中高效表达并可用于制备抗PHGPx抗体。
引用
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